Состояние естественной резистентности и иммунологической реактивности у новорожденных телят при колибактериозе

Рефераты по медицинским наукам » Состояние естественной резистентности и иммунологической реактивности у новорожденных телят при колибактериозе

Государственный Аграрный Университет Молдовы

На правах рукописи

ЖOCAH Николай Степанович

УДК 619:619. 98-092:636.2-053.2

СОСТОЯНИЕ ЕСТЕСТВЕННОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ И ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ У НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ ПРИ КОЛИБАКТЕРИОЗЕ

16.00.03 – ветеринарная микробиология и вирусология

Диссертация

на соискание ученной степени доктора ветеринарных наук

Научный консультант Скутару Иван Гаврилович доктор-хабилитат ветеринарных наук профессор

Кишинев 1998

Содержание:

Список условных сокращений……………………………6

ВВЕДЕНИЕ....................................................................... 7

РАЗДЕЛ I ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ...................................... 17

1.1. Краткие сведения о колибактериозе телят........... 17

1.2. Специфическая иммунологическая реактивность телят в постнатальный период............................ 43

1.3. Неспецифическая иммунологическая реактивность новорожденных телят......................................... 53

1.4. Получение и применение лактоглобулинов.......... 57

заключение................................................................ 64

РАЗДЕЛ 2 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ....................................................................................... 66

2.1. Материалы и методы исследований..................... 66

2.2. Изучение специфической иммунологической реактивности телят в постнатальный период...... 89

2.2.1. Уровень иммуноглобулинов в сыворотке крови телят до приема молозива и через 24ч после рождения и взаимосвязь между концентрацией иммуноглобулинов и проявлением синдрома нарушения пищеварения.................................. 90

2.2.2. Количественная характеристика абсорбции колостральных иммуноглобулинов новорожденными телятами. ....................................................... 94

2.2.3. Уровень колостральных иммуноглобулинов в сыворотке крови новорожденных телят через 6 24 и 48 ч после рождения...................................... 100

2.2.4. Количественное определение колостральных иммуноглобулинов в сыворотке крови и в фецес неонатальных телят....................................... 102

2.2.5. Концентрация иммуноглобулинов в сыворотке крови и секрете молочной железы коров................... 103

2.2.6. Содержание иммуноглобулинов в сыворотке крови коров и новорожденных телят........................ 105

2.2.7. Уровень антител против О-антигенов Е. coli в нормальном коровьем молозиве молоке и сыворотке крови новорожденных телят........................... 110

2.2.8. Уровень антител против К-антигенов Е. coli в нормальном коровьем молозиве молоке и в сыворотке крови новорожденных телят........... 120

2.2.9. Протективный механизм молозива при колибактериозе новорожденных телят............. 131

2.2.10. Факторы влияющие на выживание новорожденных телят............................................................ 134

2.2.11. Клиническая оценка эффективности вакцинации коров для профилактики колибактериоза телят. 137

ВЫВОДЫ....................................................................... 145

РАЗДЕЛ 3 ИЗУЧЕНИЕ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ РЕАКТИВНОСТИ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛяТ.......................................... 147

3.1. Биохимический анализ крови новорожденных телят......................................................................... 147

3.2. Коррекция кислотно-основного баланса при диареи неонатальных телят......................................... 154

3.3. Изменение фагоцитарныхных показателей у новорожденных телят в зависимости от клинического статуса............................................................ 158

3.4.Бактерицидная активность сыворотки крови новорожденных телят....................................... 171

3.5. Комплементарная активность сыворотки крови новорожденных телят....................................... 178

3.6. Лизоцимная активность сыворотки крови......... 184

3.7. Пропердиновая активность сыворотки крови..... 189

ВЫВОДЫ....................................................................... 193

РАЗДЕЛ 4 ЭФФЕКТИВНОСТЬ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ПРЕПАРАТОВ ПРИ КОЛИБАКТЕРИОЗЕ НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ........................................................................... 194

4.1. Эффективность применения колостральной сыворотки и лактоглобулина для коррекции иммунодефицита неонатальных телят......................................... 194

4.2. Эффективность лактоглобулина и ретинола применяемых с целью коррекции иммунодефицита новорожденных телят....................................... 198

4.3. Применение хлорпромазина и Т-активина для лечения телят больных колибактериозом....................... 203

ВЫВОДЫ....................................................................... 209

5. Обсуждение результатов исследований..... 210

6. ВЫВОДЫ................................................................... 222

7. РЕКОМЕНДАЦИИ ПРОИЗВОДСТВУ........................... 228

СПИСОК условных сокращений

агт – агглютинационный тест

ант – антиглобулиновый тест

атф – аденозинтрифосфат

днк – дезоксирибонуклеиновая кислота

мпа – мясо-пептонный агар

мпб – мясо-пептонный бульон

мппб – мясо-пептонный печоночный бульон

ра – реакция аглютинации

рнк – рибонуклеиновая кислота

рн – отрицательный логарифм концентрации водородных ионов

сда – синдром дефицита антител

tl – термолабильная фракция E. coli

ts – термостабильная фракция E. coli

фэк-м – фотоэлектрокаллориметр

цамф – циклический 3’5’ - аденозинмонофосфат

ВВЕДЕНИЕ

Успешное развитие животноводства во многом зависит от направленного выращивания молодняка сочетающего высокую продуктивность с устойчивостью организма к заболеваниям.

Результаты многочисленных исследований состояния естественной резистентности организма сельскохозяйственных животных свидетельствует о том что защитные силы являются динамичным показателем и определяется как генетическими особенностями организма так и воздействием различных факторов окружающей среды. Это обстоятельство позволяет направленно влиять на формирование и проявление защитных сил организма. Обеспечение животным б лагоприятных условий содержания максимально отвечающих биол огическим особенностям о рганизма сложивш имся в процессе эволюционного развития способ ству ет бо лее быстрому формированию и лучшему проявл ению его защитных сил. Вместе с тем небл агоприятное воздействие окружаю щей среды приводит к ослаблению устой чивости организма защитные силы его проявл яются недостаточно что усил ива ет опасность возникновения и распространения инфекционных заболеваний. Следова тел ьно инфекционные болезни мо гут возникнуть тол ько в результате нарушения нормал ьной реактивности осл абл ения защитных свой ств организма.

На фоне наруш ения нормальной реактивности и ослабления защитных свой ств организма возникают массовые желудочно-ки шечные заболевания новорожденных животных особ енно телят. Среди них колибактериоз телят относится к числу наиболее широко распространенных инфекционных бол езн ей мол одняка и регистрируется во всех развитых странах мира в том числ е в хозяй ствах Республ ики Молдова.

Вследствие этого актуальность изучения данного заб олевания стал а не мень ше й а наоборот возросла. Это связано с резистентностью энтеротоксических штаммов Е. coli к больш инству доступных химиотерапевтических средств. Данная резистентность имеет внехромосомаль ный характер она детерминиру ется плазмидами (R) и в связи с этим постепенно охватывает все большее число штаммов энтеротоксических и опред еляется как «заразная компл ексная резистентность к антибиотикам». Кроме того про дуцируемые эшерихиями экзо- эндо - и энтеротоксин способны воздействовать самостоятел ьно что затрудняет испол ьзование средств специфической защиты и профил актики. Очень сложное многогранное и далеко не изученное воздействие возбудителя на иммунную систему организма хозяина приводящее к кр айне низкой его сопротивл яемости.

Биологическая актив ность энтеротоксинов проявляется в виде наруш ения равновесия между процессами секреции электролитов в киш ечнике. Колонизация энтеротоксических штаммов Е. coli посредством специфических фимбрий в энтероциты дает возможность проникновения в них мол екул энтеротоксинов которые нарушают состояние равновесия между объемами электролитов перемещаемых из кровеносных сосудов в кишечник и в обратном направлении это же равновесие является результатом роста секреции жидкостей эпител ием кишечных крипт и торможения их резорбции кл етками эпителия кишечных ворсинок.

Таким о бразом вследствие продуцирования кишечной палочкой (Е. coli ) энтеротоксина происходит стимул яция аденилаткиназы энтероцитов что вызывает трансформацию АТФ в циклический 3’ 5’-аденозинмонофосфат (АМФ). Одновременно изменяется функция энтероцитов которые вместо абсорбции питательных веществ элиминируют свободную воду и минеральные вещества из кл етки в киш ечник что приводит к резкому обезвоживанию и деструктивным изменениям ворсинок эпителия [E. Salajka 1980]. Следовател ьно колонизация слизистой киш ечника патогенными Е. coli имеет основное значение для развития бол езни. Смертельные исходы в ходе острой формы колибактериоза у новорожденных телят являются следствием существенных нарушений электролитного равн овесия и дегидратации.

Актуальность темы . Снижение заболеваемости и пред упреждение гибели народившегося молодняка является од ной из гл авн ых зад ач стоящих перед ветеринарной наукой и практикой.

Од ной из гл авных п ри чи н тормозящих полное сохранение нарождающегося молодняка — массовые желудочно-кишечные забол евания новорожденных ж ивотных особенно телят. Эти забол евания имеют ш ирокое распространение наносят значительный экономический ущерб и вызывают большой отход телят который составляет в странах мира от 3 1 до 31 0 % а в бывш ем СССР средний отход среди заболевших телят за ряд лет составил 18-21 % [Г. В. Гнатенко 1968; Л. К. Волынец 1975; А. В. Драгомир Е. А. Драгомир A.Ф. Карышева Ф. В. Спатарь 1985; А. А. Гутковский 1989; Ю. С. Кабанков С. Ф. Армашу 1991].

Среди заболеваний новорожденных телят колибактериоз занимает одно из ведущих мест. Он относится к числ у острых заболеваний чаще всего протекающее с признаками диареи интоксикации септицемии расстройства сердечно-сосудистой и центральной нервной системы. В возникновении развитии и исходе заболевания реактивность организм а играет первостепенную роль [С. Н. Преображенский Н. И. Блинов Н. В. Ершова Г. В. Вышинский 1974; И. М. Архангельский 1976; В. С. Бузлама С. М. Сулейманов В. Н. Долгополов Н. Н. Коновалов М. Н. Рецкий И. С. Толкачев 1978; П. А. Емельяненко 1979; Э. С. Коган 1981; В. Я. Мозгис 1982; В. М. Асламов 1983; М. А. Костына 1984; R. Morar 1985; А. Н. Голиков 1989; И. М. Карпуть А. Г. Ульянов 1990; Е. А. Маринин Т. Т. Ворошилова 1993; П. П. Игнатьев Г. Ч. Бондаренко 1994; T. E. Besser C. C. Gay 1994; A. S. Sheikh P. S. Bradford S. C. James B. Patricia B. F. Thomas H. Richard D. Gregore D. R. Lin W. Bert 1995; Д. Н. Масюк 1997].

Защитные силы животных являются основными показателями обеспечивающими устойчивость организма новорожденных телят к факторам внешней среды и их тестирование позволяет определять иммунный статус.

Н еблаг оп рия тное возд ей ствие окружающе й среды пр ив оди т к ослаблени ю у стой чивости организма и усиливает опасность возни кн овения и распространения различных заболеваний в том числе и нфекци онных. В связи с эт им акад еми к А. А. Богомол ов отмечал что инфекцио нные боле зн и могут возникну ть тол ько в р езул ьтате наруш ений нормал ьной реа ктивности осл абления защи тных свой ств организма [ С. И. Плященко В. Т. Сидоров А. Ф. Трофимов 1990].

Несмо тря на то что в профила ктике коли бактериоз а тел ят до сти гн ут ы опр ед еленные у спехи однако эта проблема еще д алеко от своего полного решен ия . Лекарственные препараты использу ем ые с это й целью не вызывают коррекцию иммунного статуса. Кроме то го реализация су ществую щих способов профил актики колибактериоза телят затру днена из‑з а отсутствия экспресс-индикаци и К-антител в колострально й сыворотке коров.

И зу чение иммунологическо й реактивности организма новорожденных телят таким об разо м приобретает актуальное значени е дл я понимания патогенез а заболевания для рационально й патогенетической терапии.

Связь работы с научными программами. Тема диссертационной работы была частью проблемы ветеринарной медицины Республики Молдова «Разработка методов и средств профилактики и борьбы с болезнями животных».

Цел ь работы. Цель работы состоит в экспериментальном и теоретическом обосновании неспецифической и специфической реактивности новорожденных телят при колибактериозе разработке иммунологически обоснованных рациональных способов коррекции иммунного статуса и ингибирования циклического аденозинмонофосфата (сАМР) посредством «анти-секреторного фактора».

Для реализации данной цели мы поставили следующиезадачи :

1. Определить уровень антител против О- и К-антигенов Е. coli в нормальном коровьем молозиве молоке и в сыворотке крови новорожденных телят.

2. Изучить количественную характеристику абсорбции колостральных иммуноглобулинов классов G М и А новорожденными телятами.

3. Выявить роль кислотно-основного баланса в течение инфекционного процесса при колибактериоза телят.

4. Установить величину взаимосвязи между показателями неспецифической реактивности; (фагоцитарная реакция бактерицидная лизоцимная комплементарная и пропердиновая активность) у здоровых больных и павших новорожденных телят.

5. Разработать способы коррекции иммунного статуса новорожденных телят и ингибирования циклического аденозинмонофосфата (сАМР) посредством «антисекреторного фактора».

Научная новизна полученных результатов.

Новизна работы заключается в том что впервые к изучению заболевания колибактериоза телят проявлен новый комплексный подход. В результате комплексно проведенных исследований изучена специфическая и неспецифическая реактивность организма новорожденных телят.

Впервые изучен уровень антител против К-антигенов в нормальном коровьем молозиве молоке и в сыворотке крови новорожденных телят.

Доказано что клинический статус новорожденных телят находится в прямой зависимости от сывороточной концентрации иммунных глобулинов и их катаболической эффективности увеличение уровня иммуноглобулинов М и А в сыворотке крови клинически здоровых животных в среднем в 5 7 и 3 4 раза по сравнению с павшими указывает на их защитную функцию. Выявлено нарушение кислотно-щелочного равновесия при диареи неонатальных телят. Доказано что сопутствующими ацидозу были отклонения в уровнях сывороточных хлоридов натрия кальция и калия. Применение электролитного раствора корректировало указанные аномалии.

Установлена взаимосвязь между фагоцитарными показателями и бактерицидной активностью сыворотки крови между фагоцитарной активностью и уровнем пропердина между уровнем пропердина и лизоцимной активностью между уровнем комплемента и фагоцитарной активностью у здоровых больных и павших телят.

Обоснованы и испытаны лекарственные препараты корректирующие иммунный статус новорожденных телят и ингибирующие циклический аденозинмонофосфат (сАМР) посредством «анти-секреторного фактора».

Практическая значимость полученных результатов. На основании результатов исследований определен уровень антител против О- и К-антигенов Е. coli . Изучена количественная характеристика абсорбции колостральных иммуноглобулинов новорожденными телятами.

Материалы дают информацию о содержании иммуноглобулинов G M и А в сыворотке крови и в фекалиях телят больных колибактериозом а также об экспресс методах для определения иммунного статуса новорожденных телят.

Для коррекции иммунного статуса испытан лактоглобулин совместно с ретинолом. Испытан хлорпромазин совместно с Т-активином для ингибирования циклического аденозинмонофосфата.

Результаты исследований позволяют дать теоретически обоснованные рекомендации по коррекции специфической реактивности организма новорожденных телят для понимания патогенеза заболевания и для рациональной патогенетической терапии так как в возникновении развитии и исходе заболевания реактивность организма играет первостепенную роль.

Основные результаты исследований используются в учебной и научно-исследовательской работе и в практической деятельности ветеринарных специалистов хозяйств Республики Молдова.

Для ветеринарной наук и практики предложены:

I. Методические рекомендации по применению колостральной сыворотки и лактоглобулина для коррекции иммунодефицита неонатальных телят. Одобрены научно-техническим советом Министерства сельского хозяйства и продовольствия Республики Молдова. Изданы: Молдагроинформреклама Кишинев 1992.

II. Методические рекомендации – Экспресс-метод индикации антиген-агглютининов против К-антигена Е. coli в колостральной сыворотке коров и в сыворотке крови новорожденных телят. Одобрены Научно-техническим советом Министерства сельского хозяйства и продовольствия республики Молдова Кишинев 1994.

Разработаны способы:

I. Коррекция иммунодефицита неонатальных телят. (Brevet de invenţie n 345) Republica Moldova.

II. Лечение телят больных колибактериозом (Brevet de invenţie nr. 409) Republica Moldova.

III. Результаты исследований включены в тексты лекций и реализуются на лабораторно-практических занятиях со студентами ветеринарного и зооинженерного факультетов Государственного аграрного университета Республики Молдова.

Личный вклад соискателя. Автором самостоятельно выполнен весь объем экспериментальных исследований. Биохимический анализ крови проводили на венгерской лабораторной установке «Контифло».

Апробация результатов диссертации. Результаты научных исследований доложены и одобрены на состоявшемся в октябре 1972 г. в г. Москве Пленуме отделения ветеринарии ВАСХНИЛ по проблеме лечения и профилактики болезней молодняка сельскохозяйственных животных; на научной конференции профессорско-преподавательского состава Одесского сельскохозяйственного института (Одесса 1974); на научной конференции по вопросам повышения продуктивности сельскохозяйственных животных в условиях Северного Казахстана (Целиноград 1976) на Республиканской научной конференций профессорско-преподавательского состава и аспирантов Кишиневского сельскохозяйственного института им. М. В. Фрунзе (Кишинев 1977); на 3-х конференциях профессорско-преподавательского состава научно-исследовательской конференции Кишиневского сельскохозяйственного института (Кишинев 1979 1980 1982); на Республиканской научно-производственной конференции (Кишинев 1981); на Республиканской научно-практической конференции «Технические проблемы продовольственной программы» (Кишинев 1984); на Всесоюзной научно-производственной конференции «Вопросы интенсификации и научно-обоснованного ветеринарного обслуживания промышленного животноводства» (Кишинев 1987); на заседаниях Ученого совета ветеринарного факультета Государственного аграрного университета Республики Молдова. (1988-1998 гг.).

Публикации .По материалам диссертации опубликовано 37 работ в трудах ВАСХНИЛ межвузовских сборниках и республиканских изданиях в том числе 2 учебника (учебные пособия) 1 монография 29 научных статей 2 патента 1 рацпредложение 2 методические рекомендации.

Стру ктур а и объем диссертации. Дис се ртация изложена на 229страницах машинописного те кста и сос тоит из вве дения обз ора литературы результатов собственных исследований обсужд ения полученных результатов вывод ов рекомендаций производству списка литературы и приложения.

Страницы: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 16