1. Свободный объем колонки (объем подвижной фазы).
Свободным объемом (Vm
) хроматографической колонки считается объем подвижной фазы между верхней и нижней границами набивки. Экспериментально принято определять свободный объем, как общий удерживаемый объем такого компонента, который практически не удерживается на сорбенте. Однако не следует забывать, что из полученного результата следует вычесть объемы, которые не заполнены сорбентом. Это, прежде всего, объемы соединительных трубок и регистрирующего датчика. Не все помнят о том, что из полученной экспериментальной величины Vm
следует еще вычесть половину вводимого объема пробы! Таким образом, свободный объем колонки равен
Vm
= Vmro
- Vo
- Vin
/2 , |
(1) |
где
Vmro
- общий удерживаемый объем не удерживаемого компонента смеси;
Vo
- объем, не занятый сорбентом;
Vin
- объем вводимой пробы.
2. Объем пробы.
Объем пробы является третьим по значению параметром, влияющим на ширину хроматографических пиков. Первыми, без сомнения, являются удерживаемый объем и число теоретических тарелок. Проба влияет на ширину пика не только своей величиной, но и видом своего концентрационного профиля. Опыт показывает, что в зависимости от конструкции устройства ввода пробы, проба претерпевает изменения до того, как она достигнет сорбента. Изменения состоят в том, что концентрация вещества в разных местах будет неодинакова, т. е. концентрационный профиль может существенно отличаться от прямоугольной формы. Скорее всего, профиль может иметь вид кривой Гаусса.
Рассмотрим на примере этих 2-х случаев вклад пробы в ширину хроматографического пика. Для прямоугольного концентрационного профиля вклад объема пробы выражается следующей формулой:
= o
[ 0,257 (Vin
/ o
)2
+1], |
(2) |
где
- ширина пика на расстоянии полувысоты от основания пика;
o
- ширина пика при исчезающе малом объеме пробы;
Vin
- объем пробы.
Это формула верна при 0<= Vin
/ o
<=2.
Если концентрационный профиль пробы представляет собой кривую Гаусса, то ширина пика равна
2
= o
2
+ in
2
, |
(3) |
где
in
- ширина кривой концентрационного профиля.
Сравнение этих 2-х формул показывает, что при небольших величинах объема пробы ход закономерности фактически идентичен. Можно сказать, что
Отсюда следует, что при небольших объемах пробы нет большой необходимости в выяснении вида концентрационного профиля.
3. Расчет числа теоретических тарелок.
Наиболее распространены 2 формулы для расчета числа теоретических тарелок:
N = 5,545 Vmr
2
/ o
2
и N = 5,545 Vr
2
/ o
2
, |
(5) |
где
Vr
- удерживаемый объем компонентасмеси;
Vmr
- общий удерживаемый объем компонентасмеси (Vmr
= Vr
+ Vm
);
N - число теоретических тарелок.
Честно говоря, ни одна из этих формул не выполняет удовлетворительно своих функций. Доказательством этого служат различные оговорки, которые сопровождают расчеты. Обычно говорят, что число теоретических тарелок для такого-то вещества составляет величину X, а для такого-то вещества - Y, хотя оба этих вещества принадлежат одному хроматографическому разделению.
Лучшими показателями обладает формула
N = 5,545 Vmr
Vr
/o
2
, |
(6) |
так как не требует дополнительных условий и оговорок. Для всех пиков вычисленное значение числа теоретических тарелок одинаково!
Однако, приступая к расчетам, следует учесть влияние величины объема пробы на ширину хроматографического пика. Используя рассуждения об объеме пробы, высказанные в предыдущем разделе, можно с уверенностью записать:
N = 5,545 Vmr
Vr
/(2
- in
2
). |
(7) |
Если есть необходимость выразить объем пробы, не пользуясь понятиями кривой Гаусса, то
N = 5,545 Vmr
Vr
/(2
- (0,7Vin
)2
). |
(8) |
Такого рода замена возможна так, как мы выяснили ранее, что при небольших объемах пробы трудно отличить пробу с прямоугольным концентрационным профилем от пробы с профилем кривой Гаусса. Если объемы пробы большие и концентрационный профиль прямоуголен, то без сомнения следует пользоваться более сложной формулой, использующей уже известную закономерность влияния пробы на ширину пика (2).
Для вычисления числа теоретических тарелок лучше пользоваться линеаризованным видом формулы (7):
2
= 5,545 Vr
Vmr
/N + in
2
. |
(9) |
Тогда рассматривая график функции в координатах 2
от Vr
Vmr
, можно вычислить одновременно число теоретических тарелок и объем пробы.
Излишне говорить о том, что свободный объем колонки должен быть определен, как можно точнее. Лучше воспользоваться советами, изложенными в п.1.
Другие работы по теме:
Расчеты наличными денежными средствами 2
Расчеты наличными денежными средствами периодически осуществляются практически всеми субъектами предпринимательской деятельности независимо от их организационно-правовой формы, объемов реализации и прочих финансово-экономических показателей с целью ускорения расчетов и снижения издержек, связанных с оформлением безналичных операций.
Учет расчетов по займам
Заемные средства – средства, полученные организацией в виде банковских кредитов, займов. Для Заемных средств характерны возвратность и срочность. Они могут быть долгосрочными (срок погашения более 1 года) и краткосрочные (срок погашения менее 1 года).
Платежная система
РОССИИ, РАСЧЕТНЫЕ И КАССОВЫЕ ОПЕРАЦИИ БАНКОВ Платежная система России Платежная система – это совокупность организационных форм, инструментов и процедур, способствующих денежному обращению.
Бухгалтерский учет
Корреспонденция счетов по операциям. Обороты за месяц и конечные остатки по счетам. Оборотная ведомость по синтетическим счетам.
Ионно-парная хроматография
Сущность и содержание ионно-парной хроматографии, ее использование в жидкостной хроматографии и экстракции для извлечения лекарств и их метаболитов из биологических жидкостей в органическую фазу. Варианты ионно-парной хроматографии, отличительные черты.
Ионообменная хроматография 3
Введение Ионообменная хроматография – метод разделения, анализа и физико-химического исследования веществ, основанный на различии констант ионообменного равновесия между неподвижной фазой и компонентами разделяемой смеси. Применяется в основном при неорганическом анализе. Этот широко распространенный в настоящее время метод был разработан в 1947 году, когда Т.Б.
Лигандообменная хроматография
Назначение лигандообменной хроматографии, принцип и этапы ее реализации, задействованные элементы. Определение микропримесей в жидкостной хроматографии, рекомендации по его проведению. Методика анализа сложных примесей и инструментарий для него.
Хроматографический анализ
Хроматоргафический анализ - метод идентификации химических элементов и их соединений. Физико-химические методы. Классификация хроматографических методов. Краткие сведения о хроматографических методах анализа. Виды хроматографического анализа.
Хроматографические методы
Обращенно-фазовая хроматография. Химически привитые сорбенты в колоночной жидкостной хроматографии для получения гидрофобных распределительных систем. Элюотропный ряд растворителей. Гель-проникающия, ионообменная и распределительная хроматография.
Исследование и разработка новых сорбентов
Сущность хроматографических методов анализа вещества и применение сорбентов для исследований. Сравнение эксплуатационных свойств хелатсодержащих, карбоксильных, полимерных сорбентов для хроматофокусирования, роль силикагелей в газовой хроматографии.
Газовая хроматография
Газовая хроматография как наиболее теоретически разработанный метод анализа, достоинства, область применения. Газохроматографический анализ неорганических веществ, требования к анализируемым веществам. Анализ металлов и их соединений, определение воды.
Актуарные расчеты 2
Вопрос 6 Актуарные расчеты — система статистических и экономико-математических методов расчетов тарифных ставок и определения финансовых взаимоотношений страховщика и страхователя. Актуарные расчеты отражают механизм образования и расходования страхового фонда в долгосрочных страховых операциях, связанных с продолжительностью жизни населения.
Учет ценных бумаг и валютный операций
Вариант 3 Задача 1 Приобретены собственные акции АО по курсу 90% от номинальной стоимости 200 тыс. руб. 1.1. На сумму приобретения собственных по номинальной стоимости 200 тыс.руб. делается проводка:
Показатель преломления
Показа́тель преломле́ния вещества — величина, равная отношению фазовых скоростей света (электромагнитных волн) в вакууме и в данной среде
Основы автоматики и управления
МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ИНСТИТУТ РАДИОТЕХНИКИ, ЭЛЕКТРОНИКИ И АВТОМАТИКИ (ТЕХНИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ) ОСHОВЫ АВТОМАТИКИ И УПРАВЛЕHИЯ РЕФЕРАТ Использование персонального компьютера фирмы IBM для сбора и обработки данных в газовой хроматографии
Знакомство с экстракционной хроматографией
Принцип экстракционной хроматографии несложен и заключается в том, что в качестве неподвижной фазы используется экстрагент, нанесенный на порошкообразный пористый материал.
Хроматографическая ионометрия
В большинстве случаев коэффициенты селективности электродов пропорциональны отношению коэффициентов распределения основного и мешающего ионов.
Расчеты во фронтальной хроматографии
Так как для фронтальной хроматографии предполагается, что объем пробы неограниченно велик, то перемещение хроматографической зоны рассматривается как суммарный результат движения множества хроматографических пиков.
Задача по Бухгалтерскому учету 2
Задача 21. Отразите в бухгалтерском учете покупателя операции, связанные с обнаружением недостачи при приемке товара. Магазин получил товары от поставщика по счету, который включает (руб.):
План счетов бухгалтерского учета
Наименование счета Номер и название субсчета РАЗДЕЛ 1. Основные средства и другие долгосрочные вложения Основные средства По видам основных cpедств
План счетов
┌──────────────────────────────┬─────┬───────────────────────────┐
Бухгалтерский учет
Оборотная ведомость по счетам синтетического учета Наименование счетов Сальдо на 01.01.2002 Оборот за январь Сальдо на 01.02.2002 01 "Основные средства"
Молекулярная масса белков
Белки относятся к высокомолекулярным соединениям, в состав которых входят сотни и даже тысячи аминокислотных остатков, объединенных в макромолекулярную структуру.
Методы определения N-концевой аминокислоты
Для определения природы N-концевой аминокислоты предложен ряд методов, в частности метод Сэнджера (F. Sanger), основанный на реакции арилирования полипептида 2,4-динитрофторбензолом (ДНФБ).
Возможности ионообменной хроматографии
Понятие градиентной элюции: переход на элюцию непрерывным градиентом концентрации соли. Ионообменная и распределительная хроматография. Гидрофобизированные матрицы сефарозы. Секвенирование белков по методу Эрдмана. Характеристика аффинной хроматографии.
Разделение пигментов методом бумажной хроматографии
Изучение методов разделения пигментов с помощью бумажной хроматографии и определения их концентрации. Характеристика способов получения вытяжки пигментов, спектрофотометрирования, нанесения пигментов на бумагу, эллюции пигментов с бумажного носителя.
Безналичные расчеты 4
Безналичные расчеты Знать к экз Преимущества Принципы(объяснить каждый) Договор банковского счета и обязанности сторон Расчетный счет(простой и контокоррентный)